目的:观察基质辅助激光解吸电离飞行时间(Matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight,MALDI-TOF)技术在重症肺炎痰液样本病原菌检测和鉴定中的应用效果.方法:选取我院2021年7月至2021年12月收治的214例重症肺炎患者为研究对象,分别采用MALDI-TOF技术、VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定系统(VITEK 2 Compact automatic microbial analyze,VITEK-2)和基因测序法对患者痰液样本进行病原菌检测和鉴定,以基因测序法为金标准,比较两种检测方法对病原菌的鉴定结果,对比其他两种检测技术对病原菌的鉴定率以及鉴定结果差异.结果:214例重症肺炎痰液样本中,包括金黄葡萄球菌46例、表皮葡萄球菌33例、头部葡萄球菌7例、孔氏葡萄球菌6例、粪肠球菌4例、铜绿假单胞杆菌38例、肺炎克雷伯杆菌14例、不动杆菌12例、大肠埃希菌37例、阴沟肠杆菌7例、嗜麦芽杆菌3例、其他类型病菌7例.MALDI-TOF技术对重症肺炎痰液样本病原菌鉴定准确率明显高于VITEK-2技术(P<0.05).两组检测技术漏诊率比较差异无统计学意义(P>0.05),MALDI-TOF技术对重症肺炎痰液样本病原菌误诊率明显低于VITEK-2技术(P<0.05).结论:MALDI-TOF技术在重症肺炎痰液样本病原菌检测和鉴定中,能快速且准确鉴定出病原菌信息,为临床诊治提供可靠依据.